Razlika između Elise i Western Blota

Elisa vs Western Blot

HIV AIDS je postao globalni problem i učestalost ove užasne bolesti naglo se povećala u posljednjih nekoliko desetljeća. Mnogo je tehnika spoznaje prisutnosti virusa u ljudskom tijelu, a od njih su danas vrlo popularni ELISA i Western Blot. Postoje dvije sličnosti u ove dvije vrste ispitivanja. Međutim, postoje i mnoge razlike o kojima će se govoriti u ovom članku.

Što je ELISA?

Zalaže se za ispitivanje imunosorbentom vezanog za enzim i bio je prvi test dizajniran prvenstveno za otkrivanje HIV-a. ELISA je poznata po visokoj osjetljivosti. U ovom testu bolesnikov serum se razrjeđuje snažno (400 puta) i stavlja se na ploču na kojoj su već prisutni antigeni HIV-a. Ako serum sadrži antitijela za HIV, oni se drže ovih antigena. Pločica se zatim opere kako bi se uklonili svi ostali dijelovi pacijentovog seruma, a na ploču se nanese drugo posebno pripremljeno antitijelo. To se antitijelo veže na ljudska antitijela i veže se za enzim. Primjenjuje se supstrat za enzim i promjena boje zbog katalize enzima daje rezultate ispitivanja. Ovaj test daje rezultate u brojevima.

Što je Western Blot?

Ovo je ujedno i postupak otkrivanja antitijela. Suprotno ELISA virusnim proteinima se prije odvajaju i imobiliziraju i vrši se vizualizacija serumskih antitijela na određene HIV proteine. Zbog toga se stanice zaražene HIV-om otvaraju. Njihovi se proteini skupljaju u pločicu gela i kroz njih se provodi električna struja. Različiti proteini, ovisno o njihovoj veličini, kreću se različitim brzinama. Ti se proteini odvajaju i prenose u membranu, nakon čega se postupak nastavlja slično ELISA.

Koja je razlika između Elise i Western Blota?

I ELISA i Western Blot nazivaju se neizravnim testovima, jer mjere reakciju imunološkog sustava na infektivnog agensa, a ne traže komponente samog agensa. Budući da ELISA otkriva HIV antitijela koja tijelo počinje stvarati između 2-12 tjedana nakon zaraze HIV-om, stručnjaci kažu da bi se trebalo provjeriti najmanje 3 mjeseca nakon nezaštićenog testa da bi se potvrdilo da ima HIV AIDS. Western Blot je najčešća metoda ispitivanja kojom se potvrđuju pozitivni rezultati ELISA testa. Western Blot se više koristi kao potvrdni test jer ga je teško izvesti i zahtijevati visoke vještine. Jedna prednost Western Blota je ta da je manja vjerojatnost davanja lažnih pozitivnih rezultata jer može učinkovito razlikovati protutijela na HIV i druga protutijela.