Razlika između testa Bradforda i Lowryja na proteine

ključna razlika Između bradfordskog i niskoproteinskog ispitivanja je to Bradford test za proteine ​​zasnovan je na pomaku apsorpcije boje Coomassie briljantno plavog G-250, dok se Lowry protein test temelji na reakciji iona bakra (Cu +) nastalih oksidacijom peptidnih veza s Folin-Ciocalteu reagensom.

Analiza je analitička tehnika koja pomaže u karakterizaciji glavnih funkcionalnih komponenti uzorka. Dakle, ispitivanje može biti ili kvalitativni ili kvantitativni test. Mnoga područja, uključujući laboratorijsku medicinu, farmakologiju, biologiju okoliša, molekularnu biologiju, biokemiju i imunologiju, rutinski koriste ove vrste ispitivanja. Bradford i Lowry protein test su dva biokemijska ispitivanja koja određuju koncentraciju proteina u uzorku otopine. Oba ispitivanja koriste kolorimetrijske tehnike za postizanje rezultata.

SADRŽAJ

1. Pregled i ključne razlike
2. Što je Bradford analiza proteina
3. Što je test niskog proteina
4. Sličnosti između Bradfordove i Lowry-ove analize proteina
5. Usporedna usporedba - Bradford vs Lowry protein test u tabličnom obliku
6. Sažetak

Što je Bradford analiza proteina?

Bradford test za protein je brzi spektroskopski analitički postupak za analizu proteina. Pokazuje visoku točnost kod mjerenja koncentracije proteina u otopini. Marion Bradford je uvela ovaj postupak 1976. U ovom se ispitivanju ukupna reakcija temelji na aminokiselinskom sastavu izmjerenih proteina. Drugim riječima, Bradford test za proteine ​​je kolorimetrijski test. Koristi boju Coomassie briljantno plavu boju. Dakle, ovaj kolorimetrijski test proteina ovisi o pomaku apsorpcije boje. Coomassie sjajno plava boja G-250 postoji u tri formata: kationski (crveni), anionski (plavi) i neutralni (zeleni). Tijekom kiselih uvjeta, crveni oblik boje se pretvara u plavu. Potvrđuje vezanje proteina. Ako proteina nema, otopina može ostati u smeđoj boji.

Slika 01: Bradford test za proteine

Bradford test za proteine ​​razlikuje se od ostalih testova na protein jer je manje podložan interferencijama različitih kemijskih spojeva prisutnih u otopini proteina. Ti spojevi uključuju natrij, kalij, glukozu i saharozu, itd.

Što je test niskog proteina?

Test niskih proteina biokemijski je test koji se koristi za određivanje ukupne razine proteina u otopini. Oliver H. Lowry je osoba koja je razvila ovaj reagens 1940. Postupak prikazuje ukupnu koncentraciju proteina u otopini promjenom boje koja je proporcionalna koncentraciji proteina u otopini. Dakle, ovo je također kolorimetrijski test proteina.

Reakcija između bakarnih iona (Cu +) nastala oksidacijom peptidnih veza i Folin-Ciocalteu reagensa je osnova ovog postupka. Također, ovaj reagens sadrži fosfomolibdinsku kiselinu i fosfor-volngstičnu kiselinu. Međutim, mehanizam reakcije ispitivanja Lowry proteina nije dobro razumljiv. Ali uključuje oksidaciju ostataka cisteina, triptofana i tirozina smanjenjem Folin-Ciocalteu reagensa.

Slika 02: Test niskog proteina

Ostaci cisteina doprinose apsorpciji koja je uočena u Lowry testu proteina i reakcija rezultira sjajno plavom molekulom; heteropoly molibden blue. Redukcija ove molekule mjeri se apsorbancijom na 660nm. Dakle, koncentracija cisteina i triptofanskih ostataka koja je smanjila reagens Folin-Ciocalteu smanjuje ukupnu koncentraciju proteina u otopini..

Koje su sličnosti između Bradfordove i Lowry-ove analize proteina?

• Bradford i Lowry protein ispitivanja određuju koncentraciju proteina u otopini.
• Obje su metode kolourimetrijske metode.
• Također, osjetljivost obje metode je visoka.

Koja je razlika između Bradfordove i Lowry-ove analize proteina?

Bradford i Lowry test proteina su dvije vrste ispitivanja koja određuju koncentraciju proteina u otopini. Bradford test za proteine ​​temelji se na pomaku apsorpcije boje Coomassie briljantno plavog G-250, dok test Lowry proteina ovisi o reakciji bakarnih iona nastalih oksidacijom peptidnih veza, sa Folin-Ciocalteu reagensom. Dakle, ovo je ključna razlika između testa proteina Bradford i Lowry. Bradfordovom analizi bjelančevina potrebno je 15 minuta za postizanje rezultata, dok za niži test proteina treba 40-60 minuta za dobivanje rezultata. Dakle, ovo je još jedna razlika između testa Bradford i Lowry proteina. Nadalje, test Bradford proteina ovisi o sastavu aminokiselina, dok je Lowryjev test za djelimično ovisan o sastavu aminokiselina. Dakle, ovo je i razlika između testova proteina Bradford i Lowry.

Ispod inforaphic daje više detalja o razlici između Bradfordove i Lowry analize proteina.

Pregled - Bradford vs Lowry protein test

Analiza je analitička tehnika koja se koristi da se karakterizira glavna funkcionalna komponenta uzorka. Bradford i Lowry test proteina su dvije vrste testova proteina koji djeluju pod kolorimetrijskim tehnikama. Oba ispitivanja u Bradfordu i Lowryju određuju koncentraciju proteina u otopini. Međutim, ključna razlika između Bradfordove i Lowry-ove analize proteina leži u kolorimetrijskoj tehnici koju koriste. Bradford testom proteina koristi se Coomassie sjajno plavim G-250, dok Lowry protein test koristi ione bakra (Cu +) i reagens Folin-Ciocalteu. Nadalje, Bradford metoda daje brže rezultate od Lowry proteina. Međutim, obje su metode vrlo osjetljive metode i podliježu smetnjama raznih tvari.

Referenca:

1. "Kanadski botanički časopis." Canadian Journal of Botany - 60 (7): 1046 - PDF, dostupno ovdje.
2. "Kemija ispitivanja proteina." Thermo Fisher Scientific - SAD, dostupno ovdje.

Ljubaznošću slike:

1. "Bradford protein test" Helito - Vlastiti rad (CC BY-SA 4.0) putem Commons Wikimedia