ključna razlika između HPLC i brzog HPLC je to tlak pumpe koji koristimo za HPLC iznosi oko 40 MPa dok je pritisak pumpe za brzi HPLC oko 3-5 MPa.
Najčešća tehnika koja se koristi za razdvajanje komponenata smjese je "tekuća kromatografija". Postoji nekoliko tehnika za postizanje ove svrhe, od kojih je HPLC vrlo popularna. HPLC je kratica za tekućinsku kromatografiju visokih performansi koja brzo i učinkovito identificira, kvantificira i odvaja komponente tekuće smjese. Fast HPLC je posebna primjena HPLC-a koja je od kasno privukla pažnju onih koji su uključeni u proučavanje rješenja.
1. Pregled i ključne razlike
2. Što je HPLC
3. Što je brza HPLC
4. Usporedna usporedba - HPLC u odnosu na brzi HPLC u tabelarnom obliku
5. Sažetak
HPLC je tekućinska kromatografija visoke performanse. Koristi se visoki tlak da se otapala proguraju tako da prođu kroz kolonu. Također, idealan je način odvajanja i proučavanja različitih spojeva poput aminokiselina, nukleinskih kiselina, ugljikohidrata, steroida, antibiotika i ugljikovodika. HPLC ima brojne prednosti u odnosu na druge metode razdvajanja smjesa poput veće razlučivosti i brže analize. Umanjuje potrebu ponovnog pakiranja i regeneracije i nudi bolju kontrolu nad parametrima i na taj način povećavajući učinkovitost odvajanja. U idealnom slučaju HPLC odgovara za primjenu velikih razmjera, jer može odvojiti vrlo sitne čestice i omogućava visoki tlak koji olakšava protok otapala lako.
Slika 01: Stupac HPLC
Ukratko, metoda rada HPLC tehnike je sljedeća. Prvo bismo trebali uvesti uzorak u tok mobilne faze u diskretnim malim količinama pomoću pumpe. Tlak pumpe treba održavati na 40 MPa. Taj tok mobilne faze probija se kroz kolonu HPLC. Zatim, komponente u uzorku također prolaze kroz stupac. Međutim, njihove se brzine kretanja međusobno razlikuju zbog razlike u interakcijama između komponenata uzorka i adsorbensa unutar kolone. Ovaj adsorbent nazivamo stacionarnom fazom, jer se nalazi unutar stupca (ne pomiče se). Zatim na kraju stupca možemo prikupiti uzorak koji eluira iz kolone, a samim tim, odvojeno možemo prikupiti u uzorku.
Nedavno su znanstvenici u istraživačkom institutu Schering Plough razvili brzu tehniku HPLC-a koja je napredna verzija HPLC-a jer omogućuje još brže odvajanje spojeva iz smjese. Također poznata kao brza HPLC, ova se tehnika koristi česticama 2,7um fuzije s jezgrom silike koje nastaju spajanjem 0,5um poroznog silicijevog dioksida preko čvrste čestice silike. Ove jedinstveno napravljene čestice čine postupak razdvajanja vrlo brzim i preniskim tlakom od onog koji koristimo u HPLC.
Slika 02: FPLC aparat
Brzi HPLC postiže rezultate koji se mogu usporediti s UPLC, ali znanstvenici smatraju da je ova tehnika vrhunska jer ne zahtijeva vrlo skupu opremu za visoki tlak. Ono što je sjajno je da brzi HPLC ne zahtijeva nikakve nove laboratorijske protokole.
HPLC je tekuća kromatografija visoke performanse, a brza HPLC je napredni oblik tekućinske kromatografije visoke performanse. Ključna razlika između HPLC i brzog HPLC je u tome što je tlak pumpe koju koristimo za HPLC oko 40 MPa. Dok je tlak pumpe za brzi HPLC oko 3-5 MPa. Nadalje, možemo razdvojiti različite spojeve poput aminokiselina, nukleinskih kiselina, ugljikohidrata, steroida, antibiotika i ugljikovodika pomoću HPLC tehnike dok se brza HPLC tehnika uglavnom koristi za odvajanje proteina.
Podaci u nastavku prikazuju više informacija o razlici između HPLC i brzog HPLC.
HPLC je tehnika tekuće kromatografije koja je postala vrlo popularna u cijelom svijetu. Fast HPLC je nova verzija HPLC-a, naučnici koji rade na Institutu Schering Plough razvili su ovu novu tehniku. Ključna razlika između HPLC i brzog HPLC leži u tlaku pumpe koji koristimo za odvajanje. To je; tlak pumpe koji koristimo za HPLC iznosi oko 40 MPa. No, tlak pumpe za brzi HPLC kreće se oko 3-5 MPa.
1. „Tekuća kromatografija visokog učinka.“ Wikipedia, Zaklada Wikimedia, 20. listopada 2018. Dostupno ovdje
"Za pokretanje brzog HPLC-a trebate maštovit sustav - ili radite?" Brzi HPLC - CHROMacademy. Dostupno ovdje
1. "HPLC kolom" vrata Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) putem Commons Wikimedia
2. "Lab's FPLC" Stephen Helms iz Dallasa, TX, Sjedinjene Države - FPLC našeg laboratorija (CC BY-SA 2.0) putem Commons Wikimedia