Razlika između hibridizacije in situ i imunohistokemije

Ključna razlika - hibridizacija u položaju u odnosu na imunohistokemiju
 

Dijagnostika raka i zaraznih bolesti popularan je trend u kojem se nove tehnike temeljene na proteomici i genomici koriste za identificiranje tumora ili zaraznih stanica, njegovo širenje i mjesta staničnog razvoja i analizu genetskih osnova većine zaraznih i nezaraznih bolesti. To će rezultirati u preciznoj obradi i dizajniranju lijekova te u razvoju prilagođenih terapija za bolesti. In situ hibridizacija (ISH) i imunohistokemija (IHC) dvije su tako široko korištene tehnike u biologiji karcinoma, a ključna razlika između in situ hibridizacije i imunokemije leži u molekulama koje se koriste u postupku analize. U ISH-u se u analizi koriste sonde nukleinske kiseline dok se u IHC-u koriste monoklonska i poliklonska antitijela za dijagnostička određivanja.

SADRŽAJ

1. Pregled i ključne razlike
2. Što je in situ hibridizacija
3. Što je imunohistokemija
4. Sličnosti između hibridizacije in situ i imunohistokemije
5. Usporedna usporedba - hibridizacija u položaju u odnosu na imunohistokemiju u tabelarnom obliku
6. Sažetak

Što je in situ hibridizacija (ISH)?

In situ hibridizacija je tehnika hibridizacije nukleinske kiseline koja se izvodi izravno na dijelu ili dijelu tkiva, u cijelom tkivu ili u stanicama. Tehnika ovisi o teoriji komplementarnog spajanja baze Watson Crick, što rezultira ili DNA-DNA hibridima ili DNA-RNA hibridima koji mogu detektirati mutirane gene ili identificirati potrebni gen koji nas zanima. Jednolančane DNK sekvence, dvolančane DNA sekvence, jednolančane RNA sekvence ili sintetički oligonukleotidni nizovi se koriste kao sonde tijekom tehnike hibridizacije, a ove sonde su označene radioaktivnim fosforom na svom 5 'kraju za identifikacijske postupke autoradiografijom ili označene pomoću fluorescentnih boja , Dostupne su različite vrste ISH tehnika na temelju vrste korištene sonde i vrste vizualizacije koja slijedi.

Slika 01: Fluorescentna in situ hibridizacija

Postoje mnoge primjene ISH-a, uglavnom u molekularnoj dijagnostici zaraznih bolesti da bi se utvrdila prisutnost patogena i potvrdila patogen molekularnom dijagnostikom. Također se koristi u područjima razvojne biologije, kariotipizacije i filogenetske analize i fizičkog mapiranja kromosoma.

Što je imunohistokemija (IHC)?

U tehnici IHC-a glavna analizirana molekula je antigen. Tijekom IHC-a koriste se monoklonska i poliklonska antitijela za određivanje prisutnosti antigena nakon infekcije ili statusa zloćudne proliferacije malignih stanica. Tehnika se temelji na vezivanju antigen-antitijelo, a za ovu tehniku ​​koriste se oznake enzima; jedna takva primjena je ELISA (test za imunosorbent vezan za enzim). Označivači mogu biti i fluorescentno obilježena antitijela ili radioobilježena antitijela.

Slika 02: Imunohistokemija

IHC se široko koristi za otkrivanje stanica raka. Dijagnostički postupci ciljaju antigene prisutne na stanicama tumora da identificiraju i karakteriziraju tumor. Isti postupak je uključen u dijagnosticiranje zaraznih uzročnika. Monoklonska i poliklonska antitijela također se koriste za analizu različitih genskih proizvoda omogućavanjem reakcije vezivanja antitijelo-antigen između željenog proteina i primjene sintetičkih antitijela.

Koje su sličnosti između hibridizacije in situ i imunohistokemije?

• ISH i IHC su visoko specifične reakcije.
• Obje su tehnike vrlo precizne.
• Obje se tehnike mogu koristiti u dijagnostici za rak i zarazne bolesti.
• Ove se tehnike izvode u sterilnim in vitro okruženjima.
• Obje su brze tehnike koje daju ponovljive rezultate.
• ISH i IHC koriste metode detekcije kao što su radio označavanje i fluorescentne tehnike.

Koja je razlika između hibridizacije in situ i imunohistokemije?

U hibridizaciji naspram imunohistokemije
ISH je tehnika hibridizacije nukleinske kiseline koja se izvodi izravno na dijelu ili dijelu tkiva ili cijelom tkivu.	IHC je tehnika gdje se koriste monoklonska i poliklonska antitijela za određivanje prisutnosti antigena, koji su posebni markeri proteina postavljeni na staničnoj površini.
Vrsta analiziranih bio molekula
ISH analizira nukleinske kiseline.	IHC analizira proteine-antigene.
Osnove biokemijske reakcije
Komplementarno spajanje baze između DNA-DNA ili DNA-RNA se događa u ovoj tehnici.	Interakcije antigen-antitijelo uključeni su u imunohistokemiju.
Enzimski metodi otkrivanja
Enzimske metode otkrivanja ne mogu se koristiti u ISH.	Enzimske metode otkrivanja mogu se koristiti u IHC-u.

Sažetak - Hibridizacija na terenu i imunohistokemija

Molekularna dijagnostika su brze i potvrđujuće metode koje se mogu upotrijebiti za prepoznavanje nezarazne bolesti poput raka ili zarazne bolesti poput HIV-a ili tuberkuloze, a temelje se na molekularnim markerima prisutnim na stanicama koji dovode do očitovanja bolesti. Molekularni markeri mogu biti prisutni u obliku eksprimiranih proteina ili na genetskoj razini na temelju koje se uvode različite nove tehnike radi povećanja učinkovitosti i manje su naporne, iako su velike cijene koje uključuju ove tehnike. Prema tome, ISH ovisi o formiranju hibrida DNA-DNA ili DNA-RNA, a IHC ovisi o specifičnim reakcijama između antitijela i antigena. To je razlika između in situ hibridizacije.

Preuzmite PDF verziju In situ hibridizacije vs imunohistokemije

Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti je za izvanmrežne svrhe, prema napomeni. Molimo preuzmite PDF verziju ovdje. Razlika između hibridizacije u stanju i imunohistokemije.

Reference:

1. Duraiyan, Jeyapradha i dr. "Primjene imunohistokemije." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, kolovoz 2012, dostupan ovdje. Pristupljeno 24. kolovoza 2017.
2. "In situ hibridizacija (ISH)." Nacionalni centar za biotehnološke informacije, Američka nacionalna medicinska knjižnica, dostupan ovdje. Pristupljeno 24. kolovoza 2017.

Ljubaznošću slike:

1. "RIBE (fluorescentna in situ hibridizacija)" MrMatze - Vlastiti rad (CC BY-SA 3.0) putem Commons Wikimedia
2. "Imunohistochemicalstaining2" autor Imoen na Wikipediji na engleskom jeziku (CC BY-SA 3.0) putem Commons Wikimedia