Razlika između HPLC reverzne faze i normalne faze
Share
ključna razlika između reverzne i normalne faze HPLC je da HPLC reverzne faze koristi polarnu stacionarnu fazu i manje polarnu pokretnu fazu dok normalna faza HPLC koristi nepolarnu stacionarnu fazu i polarnu pokretnu fazu.
HPLC u normalnoj fazi najstarija je tehnika HPLC-a koju je Tswett koristio u odvajanju biljnih ekstrakata; koristio je kredu u staklenom stupcu. To je bio klasični način kromatografije, koji je doveo do imenovanja "normalnom" tehnikom. S druge strane, HPLC s obrnutom fazom suprotno je normalnoj tehnici koju su znanstvenici razvijali u posljednje vrijeme.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključne razlike
2. Što je HPLC reverzne faze
3. Što je normalna faza HPLC
4. Usporedna usporedba - HPLC HP reverzne faze prema normalnoj fazi u tabelarnom obliku
5. Sažetak
Što je HPLC reverzne faze?
HPLC reverzne faze je kromatografska tehnika u kojoj koristimo hidrofobnu stacionarnu fazu. Među svim HPLC metodama koristimo ovu metodu za oko 70% zbog široke primjenjivosti i obnovljivosti. Stacionarna faza je nepolarna, a pokretna faza polarna.
Većinu vremena znanstvenici koriste vodenu mješavinu vode s miješljivim, polarnim organskim otapalom, poput acetonitrila ili metanola, kao pokretnu fazu. Stoga analiti djeluju u nepolarnoj stacionarnoj fazi.
Što je normalna faza HPLC?
HPLC u normalnim fazama je kromatografska tehnika u kojoj koristimo hidrofilnu stacionarnu fazu. To je tradicionalna metoda HPLC-a, iako je ne koristimo toliko. Stacionarna faza je polarna, a pokretna faza nepolarna. Još važnije, pokretna faza ove tehnike je 100% organska. To znači da se za to ne koristi voda.
Slika 01: Profil uzorka za HPLC kromatograme normalne i reverzne faze prema polaritetu komponenata u analitu.
Tipično, stacionarna faza sadrži silicijum, cijano, diol, amino vezene faze itd. Mobilne faze uključuju organska otapala poput heksana, etil acetata itd. Ova se tehnika temelji na zadržavanju molekula otapala ili analita na polarnoj stacionarnoj fazi.
Koja je razlika između reverzne i normalne faze HPLC?
HPLC reverzne faze je kromatografska tehnika u kojoj koristimo hidrofobnu stacionarnu fazu. Stacionarna faza ove tehnike je nepolarna. Stacionarna faza je nepolarna, dok je pokretna faza polarna. Nadalje, znanstvenici koriste vodenu mješavinu vode s pomiješanim, polarnim organskim otapalom, poput acetonitrila ili metanola, kao pokretnu fazu u HPLC s reverznom fazom. Dok je HPLC s normalnom fazom kromatografska tehnika u kojoj koristimo hidrofilnu stacionarnu fazu. Stacionarna faza ove tehnike je polarna. Stacionarna faza je polarna, dok je pokretna faza nepolarna. Uz to, znanstvenici koriste organska otapala poput heksana, etil acetata itd. Kao pokretnu fazu HPLC normalne faze. Podaci u nastavku prikazuju razliku između reverzne i normalne faze HPLC u tabelarnom obliku.
Sažetak - HPLC reverzne faze prema normalnoj fazi
Tehnike HPLC reverzne i normalne faze dvije su tekuće kromatografske tehnike. Razlika između reverzne i normalne faze HPLC je da HPLC reverzne faze koristi polarnu stacionarnu fazu i manje polarnu pokretnu fazu dok normalna faza HPLC koristi nepolarnu stacionarnu fazu i polarnu pokretnu fazu.
Referenca:
1. Vode. "Načini razdvajanja HPLC." HPLC - Objašnjena tekućinska kromatografija visoke učinkovitosti: Vode. Dostupno ovdje
