Razlika između RP HPLC i HIC

ključna razlika između RP HPLC i HIC je to RP HPLC koristi više polarnu pokretnu fazu i manje polarnu stacionarnu fazu. Dok HIC koristi hidrofobnu stacionarnu fazu koja omogućava da se hidrofobne molekule na njega vežu.

Kromatografija je analitička tehnika koja pomaže da se smjesa odvoji na njene komponente. Prvo moramo otopiti uzorak da bismo ga odvojili u otopinu. Ova smjesa otopina-tvar naziva se pokretna faza. Zatim se pokretna faza prolazi kroz drugi materijal koji se naziva stacionarna faza. Stacionarna faza određuje razdvajanje komponenata. Do odvajanja dolazi zbog podjele materijala između pokretne i stacionarne faze.

SADRŽAJ

1. Pregled i ključne razlike
2. Što je RP HPLC
3. Što je HIC
4. Usporedna usporedba - RP HPLC vs HIC u tabelarnom obliku
5. Sažetak

Što je RP HPLC?

Pojam RP HPLC znači Tekuća kromatografija s reverznom fazom. To uključuje razdvajanje komponenata u smjesi, prema hidrofobnosti. Hidrofobne komponente u pokretnoj fazi povezuju se s imobiliziranim hidrofobnim ligandima na stacionarnoj fazi, dok hidrofilne komponente eluiraju kroz stacionarnu fazu bez prianjanja na površinu stacionarne faze.

Slika 01: HPLC aparat

Štoviše, ova metoda ima veću obnovljivost u usporedbi s drugim kromatografskim tehnikama, a pokazuje i široku primjenjivost. Stoga ovu metodu koristimo u laboratorijima za više od 75% svih HPLC metoda. Kao pokretnu fazu većinu vremena koristimo vodenu mješavinu vode s miješljivim polarnim organskim otapalom. Tako će se osigurati pričvršćivanje hidrofobnih komponenata u otopini na površinu stacionarne faze.

Što je HIC?

Izraz HIC označava Kromatografija hidrofobne interakcije. To je vrsta HPLC reverzne faze, a ova se metoda koristi uglavnom za odvajanje velikih biomolekula poput proteina. U ovoj metodi moramo koristiti vodeni medij da bismo napravili uzorak biomolekule. To je zato što organska otapala mogu uzrokovati denaturaciju proteina. Nadalje, ova tehnika koristi interakciju velikih molekula s blago hidrofobnom površinom stacionarne faze. Nadalje, moramo koristiti visoku koncentraciju soli u uzorku, jer potiče zadržavanje proteina na pakiranju; ovaj se postupak naziva slanjem. Spuštanjem koncentracije soli postupno, možemo učiniti da biomolekule odvojeno eluiraju prema njihovoj hidrofobnosti.

Obično se ova metoda koristi uvjetima suprotnim onima ionske izmjene. Kod ove tehnike prvo moramo provesti pufersku otopinu kroz stupac da bismo smanjili solvaciju rastvora u uzorku. To čini hidrofobne regije proteina izloženim. Međutim, kad je molekula više hidrofobna, potrebno je manje soli za pospješivanje vezanja. Ovdje se najprije eluiraju manje hidrofobnih rastvora, a prema promjeni koncentracije soli, posljednji dio eluira se više hidrofobnih rastvora..

Koja je razlika između RP HPLC i HIC?

Kromatografija je analitička tehnika za razdvajanje komponenata u smjesi. RP HPLC i HIC dvije su specijalizirane kromatografske tehnike. Ključna razlika između RP HPLC i HIC je ta što RP HPLC koristi polarniju pokretnu fazu i manje polarnu stacionarnu fazu, dok HIC koristi hidrofobnu stacionarnu fazu, koja omogućava da se hidrofobne molekule na nju vežu.

Podaci u nastavku rezimiraju razliku između RP HPLC i HIC.

Sažetak - RP HPLC vs HIC

Kromatografija je analitička tehnika za razdvajanje komponenata u smjesi. RP HPLC i HIC dvije su specijalizirane kromatografske tehnike. Ključna razlika između RP HPLC i HIC je ta što RP HPLC koristi više polarnu pokretnu fazu i manje polarnu stacionarnu fazu, dok HIC koristi hidrofobnu stacionarnu fazu, koja omogućava da se hidrofobne molekule vežu na nju.

Referenca:

1. "Načini razdvajanja HPLC." Vode, dostupne ovdje.

Ljubaznošću slike:

1. „Pripremni HPLC“ tvrtke GYassineMrabetTalk & # x2709; Ova W3C neodređena vektorska slika stvorena je s Inkscapeom. - Vlastiti rad (CC BY 3.0) putem Commons Wikimedia