Razlika između transformacije i transfekcije

Transformacija vs transfekcija
 

Transformacija i transfekcija dvije su jednostavne tehnike koje se koriste za uvođenje stranog gena u stanicu domaćina. Međutim, ove tehnike ovise o vrsti domaćina ili vektorskih sustava.

Što je stanična transformacija?

Transformacija je tehnika koja se koristi za unošenje gena u stanice kvasca i bakterija. Ova tehnika obično uzrokuje nasljedne promjene u genima, pa je time ekspresija gena trajna. Bakterijsku transformaciju prvi je uveo 1928. godine Frederick Griffith. Tada se početkom 1970-ih ova tehnika koristila u E coli. Tijekom procesa transformacije E coli, stanice su natopljene u ledeno hladnoj otopini CaCl₂. Ovaj korak čini E coli stanice kompetentne. Nakon toga kompetentne stanice se pomiješaju sa DNA plazmida i inkubiraju na ledu 20-30 min. Zatim se daje kratki toplinski šok kako bi se omogućio prijenos DNK u stanicu. Konačno, stanice se stave u hranjivu smjesu i inkubiraju na 37 ° C 60-90 min da se uspostave plazmidi. Nakon što se ovi koraci uspješno završe, transformirane ćelije se mogu smjestiti na pogodan medij za razmnožavanje stanica. Budući da se transformacija smatra neučinkovitom tehnikom, ne može se koristiti za pripremu banana klona.

Što je stanična transfekcija?

Transfekcija je metoda uvođenja stranog gena, obično, u stanice sisavaca. Postoje dvije metode transfekcije; naime, prolazna transfekcija i stabilna transfekcija. Kod prolazne transfekcije, ekspresija gena je dostupna ograničeno vrijeme; na taj način, promjena gena izaziva privremenu ekspresiju. Ova transfekcijska metoda je jednostavna i brza; stoga se može rutinski koristiti. Jedan nedostatak prolazne transfekcije je poteškoća primjene za sustave velike sinteze proteina.

Tijekom stabilne transfekcije, ciljni gen se integrira u genom stanice domaćina, pa je ekspresija gena trajna, za razliku od prolazne transfekcije.

Koja je razlika između transformacije i transfekcije?

• Transformacija je uvođenje gena u prokariotsku stanicu (bakterijski i kvasac), dok se transfekcija obično naziva uvođenje gena u stanicu sisavca.

• Transformacija rezultira nasljednom izmjenom, u genima, dok transfekcija može rezultirati ili privremenom ekspresijom ili trajnim promjenama gena.