Razlika između kromatografije afiniteta i izmjene iona

ključna razlika između afiniteta i ionske izmjene je to možemo koristiti afinitetnu kromatografiju za odvajanje napunjenih ili neispunjenih komponenata u smjesi, dok možemo koristiti ionsko-izmjenjivačku kromatografiju za odvajanje nabijenih komponenata u smjesi.

Kromatografija je tehnika kojom se možemo koristiti da odvojimo željene komponente u smjesi. Postoje različite vrste poput tekuće kromatografije, plinske kromatografije itd. Afinitetna kromatografija i kromatografija s ionskom izmjenom dvije su potkategorije tekuće kromatografije. Također, u ovim tehnikama postoje dvije faze. Naime, oni su stacionarna i pokretna faza. Svrha ovih tehnika je odvajanje komponenata, ovisno o vezanju komponenata, u pokretnoj fazi na površinu stacionarne faze.

SADRŽAJ

1. Pregled i ključne razlike
2. Što je kromatografija afiniteta
3. Što je ionska izmjena hromatografija
4. Usporedna usporedba - Aromatnost prema kromatografiji izmjene iona u tabelarnom obliku
5. Sažetak

Što je kromatografija afiniteta?

Kromatografija afiniteta je biokemijska tehnika koju koristimo za odvajanje komponenata u smjesi, ovisno o interakciji tih komponenata.

Interakcije koje koristimo u ovom slučaju uključuju sljedeće:

1. Interakcije antigen-antitijelo
2. Interakcije enzima i supstrata
3. Interakcije receptor-ligand
4. Interakcije protein-nukleinska kiselina

U ovoj tehnici koristimo molekularna svojstva molekula za ovu tehniku ​​razdvajanja. Ovdje dopuštamo željenom spoju da djeluje sa stacionarnom fazom preko vodikove veze, ionske interakcije, disulfidnih mostova, hidrofobne interakcije itd. Molekuli koji ne stupaju u interakciju sa stacionarnom fazom prvo će eluirati. Dakle, možemo ga odvojiti od smjese. Željeni spoj ostat će vezan u stacionarnoj fazi. Stoga ga možemo odvojiti korištenjem otapala za ispiranje i učiniti ga eluiranim da se odvoji i.

Slika 01: Kromatografska kolona

Kromatografija afiniteta je korisna u pročišćavanju i koncentriranju tvari iz smjese pomoću puferske otopine. Također, korisno je u smanjivanju neželjenih tvari u smjesi. Pri razmatranju uređaja koji koristimo za ovaj postupak, trebali bismo koristiti stupac napunjen našom stacionarnom fazom. Zatim bismo trebali učitati mobilnu fazu koja sadrži biomolekule koje ćemo razdvojiti. Zatim im dopustite da se vežu sa stacionarnom fazom. Nakon toga, pomoću pufera za ispiranje, možemo odvojiti ne-ciljne biomolekule, ali ciljne molekule trebaju imati visoki afinitet prema stacionarnoj fazi da bi uspjele proces razdvajanja.

Što je kromatografija ionske izmjene?

Ionska kromatografija oblik je tekuće kromatografije u kojoj možemo analizirati ionske tvari. Često ga koristimo za analizu anorganskih aniona i kationa (tj. Kloridnih i nitratnih aniona i kalijevih, natrijevih kationa). Iako je to rjeđe, možemo analizirati i organske ione. Nadalje, ovu tehniku ​​možemo koristiti za pročišćavanje proteina, jer su proteini nabijene molekule u određenim pH vrijednostima. Ovdje koristimo čvrstu stacionarnu fazu na koju se mogu pričvrstiti napunjene čestice. Na primjer, kao čvrsti nosač možemo upotrijebiti kopolimere polistiren-divinilbenzen smole.

Slika 02: Faze kromatografije izmjene iona

Da bismo to dodatno objasnili, stacionarna faza ima fiksne ione kao što su sulfatni anioni ili kvarterni aminski kationi. Sve ovo treba povezati s protitionom (ion s suprotnim nabojem), ako želimo održati neutralnost ovog sustava. U ovom slučaju, ako je protuion kation, tada sustav nazivamo kationskom smolom. Ali, ako je protivion anion, sustav je anionska smola za izmjenu.

Postoji pet glavnih faza u procesu izmjene iona;

1. Početno stanje
2. Adsorpcija meta
3. Početak elucije
4. Kraj elucije
5. regeneracija

Koja je razlika između afiniteta i ionske izmjene hromatografije?

Afinitetna kromatografija je biokemijska tehnika koju koristimo za razdvajanje komponenata u smjesi ovisno o interakcijama tih komponenti, dok je ionska kromatografija oblik tekuće kromatografije u kojoj možemo analizirati ionske tvari. Prema tome, glavna razlika između afiniteta i ionsko-izmjenjivačke kromatografije je da ionsku izmjenjivačku kromatografiju možemo koristiti samo za odvajanje ionskih tvari, dok je afinitetna kromatografija sposobna odvojiti napunjene i neispranjene čestice. Kada se razmatra princip rada, razlika između afiniteta i ionske izmjene kromatografije je da se afinitetna kromatografija odvija zbog činjenice da ciljne molekule imaju visoki afinitet prema stacionarnoj fazi. Međutim, za kromatografiju s izmjenom iona, ciljne molekule imaju suprotan naboj od površine stacionarne faze.

Podaci u nastavku prikazuju razliku između afiniteta i ionske izmjene kromatografije kao usporedne usporedbe.

Sažetak - Aromatnost prema kromatografiji izmjene iona

Ukratko, afinitet i ionska izmjena kromatografija su dva oblika tekuće kromatografije. Ključna razlika između afiniteta i ionske izmjene kromatografije je u tome što možemo koristiti afinitetnu kromatografiju za odvajanje napunjenih ili neispranjenih komponenata u smjesi, dok možemo koristiti ionsko-izmjenjivačku kromatografiju za odvajanje nabijenih komponenata u smjesi.

Referenca:

1. "Kromatografija afiniteta". Wikipedia, Zaklada Wikimedia, 5. listopada 2018. Dostupno ovdje 
2. Libretexts. "Ion-razmjenska kromatografija." Kemija LibreTexts, Libretexts, 29. prosinca 2016. Dostupno ovdje  

Ljubaznošću slike:

1. "Nickel smola" Pdcook - Vlastiti rad, (CC BY-SA 3.0) preko Commons Wikimedia 
2. "Iex" napisao Daliak (Javna domena) putem Commons Wikimedia