Razlika između CFU i MPN

Ključna razlika - CFU i MPN
 

Jedinica za formiranje kolonija (CFU) i Najvjerojatniji broj (MPN) dvije su metode koje se koriste za nabrajanje mikroorganizama u uzorcima. Oba parametra koriste se za otkrivanje kakvoće vode i bakterija fekalnih pokazatelja u uzorcima vode. Jedinica koja formira koloniju je mjera koja se koristi za nabrajanje broja održivih bakterijskih stanica ili gljivičnih stanica u specifičnom volumenu ili težini određenog uzorka. Standardna jedinica za ovaj parametar je CFU / ml ili CFU / g. Najvjerojatniji broj je druga jedinica koja se koristi za mjerenje broja održivih bakterijskih stanica u tekućem uzorku. Ključna razlika između CFU-a i MPN-a je u tome CFU se izračunava iz bakterijskih i gljivičnih kolonija koje rastu na ploči s čvrstim agarima dok MPN se izračunava iz održivih bakterija koje rastu u tekućem mediju.

SADRŽAJ

1. Pregled i ključne razlike
2. Što je CFU 
3. Što je MPN
4. Usporedna usporedba - CFU vs MPN u tabličnom obliku
5. Sažetak

Što je CFU?

Jedinica za formiranje kolonije (CFU) je parametar koji mjeri broj održivih bakterijskih ili gljivičnih stanica u datom uzorku. Naziva se metoda koja broji jedinice koje formiraju koloniju standardni broj ploča. Životne kolonije koje se pojavljuju na agar pločama izražene su u CFU po 1 ml (jedinica koja tvori koloniju po mililitru) uzorka za tekućine ili CFU po 1 g (jedinica koja tvori koloniju na jedan gram) uzorka za krute tvari.

Postoje dvije uobičajene metode za mjerenje CFU-a u uzorku. Oni su metoda širenja ploča i metoda lijevanja ploča. Ove dvije metode su podržane tehnikom koja se naziva serijsko razrjeđivanje. Serijski razrijeđeni uzorci omogućuju dobivanje podbrojanog broja kolonija na površini agara. Poznati volumen uzorka može se raširiti na površinu ploče sa agarima, ili pomiješati sa agrom i izliti na ploču. Ploča se zatim inkubira i broje nastale kolonije. Broj kolonija odnosi se na broj mikroorganizama unutar izvornog uzorka. Ploče na kojima je prikazano previše kolonija ili premalo kolonija isključuju se iz prebrojavanja jer rezultati na tim pločicama možda neće biti statistički točni. Statistički gledano, najbolji raspon je 30 - 300 kolonija na ploči s agarima. Stoga se za točno nabrajanje trebaju odabrati ispravne ploče. Za gornju funkciju provodi se serijsko razrjeđivanje.

Jednom kada se broji broj održivih kolonija na pločama, CFU / ml može se izračunati pomoću sljedeće jednadžbe.

CFU po ml izvornog uzorka = broj kolonija na ploči X faktora razrjeđenja

Faktor razrjeđivanja = (1 / razrjeđivanje ploče)

Na primjer, ako dobijete 149 kolonija na tanjuru od 10^-4 razrjeđivanja, tada se broj bakterija u 1 ml izvornog uzorka može izračunati na sljedeći način:

CFU / ml = (149) x (1/10)^-4)

= 149 × 10⁴ ili 1490000

= 1. 49 x 10⁶

Slika 01: Jedinica za formiranje kolonije

Što je MPN?

najvjerojatniji broj je alternativna mjera CFU / ml. MPN također procjenjuje održive stanice u tekućem uzorku. Broje organizme koji rastu u tekućoj kulturi i pretežno je bakteriološka tehnika. Ova metoda je posebno korisna za uzorke koji sadrže niske koncentracije bakterijskih stanica; na primjer, mlijeko, pitka voda itd. MPN vrijednost izražena je za 100 ml volumena. MPN se oslanja na statističku metodu koja se temelji na teoriji vjerojatnosti. Postoje statističke tablice dizajnirane za pronalaženje MPN vrijednosti na 100 ml uzorka. Ove tablice prikazuju rezultate sa granicama pouzdanosti od 95%.

MPN vrijednost izračunava se provođenjem tehnike koja se naziva metoda višestruke fermentacije u epruveti. Tri skupine epruveta koje sadrže pogodan medij za kulturu inokuliraju se s tri različita volumena uzorka, poput 10 ml, 1 ml, i 0,1 ml, i inkubiraju za rast. Nakon razdoblja inkubacije, epruvete se ocjenjuju + (pozitivno) ili - (negativno) za prisustvo ili odsutnost rasta. Obrazac pozitivnih i negativnih rezultata zatim se uspoređuje s MPN tablicom statističkih vjerojatnosti za procjenu broja mikroorganizama. Tada se daje vrijednost MPN za 100 ml uzorka. MPN se široko koristi za otkrivanje koliformnih bakterija prisutnih u uzorcima vode.

Slika 02: MPN tablica

Koja je razlika između CFU-a i MPN-a?

CFU vs MPN
CFU je mjera koja se koristi za izražavanje broja održivih bakterijskih ili gljivičnih kolonija u datom uzorku.	MPN je alternativna mjera CFU-u i mjeri broj održivih bakterijskih stanica u tekućem uzorku.
Jedinica
CFU / ml ili CFU / g	MPN / 100 ml
računanje
CFU se izračunava računanjem broja kolonija koje su uzgajane na pločama s agarima.	MPN se izračunava usporedbom pozitivnih i negativnih uzoraka epruveta sa MPN statističkom tablicom.
Tehnika serijskog razrjeđivanja
Serijsko razrjeđivanje provodi se prije stavljanja uzoraka na ploče s agarima.	Serijsko razrjeđivanje se obično ne provodi kad se izračuna MPN
metode
Metoda raspršivanja ploče i metoda lijevanja ploča dvije su metode koje se obavljaju za dobivanje CFU-a.	Fermentacija više epruveta je metoda kojom se dobiva MPN vrijednost.

Sažetak - CFU i MPN

Mjerenje mikrobnog rasta potrebno je iz više razloga. U postrojenjima za preradu hrane potrebno je izmjeriti razinu i vrstu mikroorganizama u hrani. U prehrambenoj industriji i medicini potrebno je osigurati da se postupci sterilizacije učinkovito primjenjuju. U postrojenjima za pročišćavanje otpadnih voda potrebno je redovito uzimati broj mikroba. Pri optimizaciji postupka u molekularnoj biologiji potrebno je izmjeriti broj kolonija na pločama. Dakle, dostupne su različite metode za popis i rast mjerenja. CFU i MPN dvije su takve metode koje se široko primjenjuju na raznim područjima. CFU je mjera broja održivih bakterijskih i gljivičnih kolonija prisutnih u datom uzorku. Izračunava se pomoću standardne metode brojanja ploča ili metode održivog brojanja ploča. MPN je druga mjera koja izražava broj bakterijskih stanica prisutnih u određenom volumenu tekućeg uzorka. Izračunava se primjenom višestruke fermentacijske epruvete i MPN tablicom. To je razlika između CFU i MPN.

Preuzmite PDF verziju CFU vs MPN

Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti je za izvanmrežne svrhe, prema navodima citata. Molimo preuzmite PDF verziju ovdje Razlika između CFU i MPN.

Reference:

"Jedinica koja formira koloniju." Wikipedia. Zaklada Wikimedia, 28. svibnja 2017. Web. Dostupno ovdje. 01.06.2017.
"Mikrobiologija - 014 - najvjerojatniji broj." Mikrobiologija - 014 - najvjerojatniji broj | Preddiplomski studij mikrobiologije. N.p., n.d. Mreža. Dostupno ovdje. 01.06.2017.

Ljubaznošću slike:

1.” Ručno brojanje CFU-a “Autor Quentin Geissmann - Vlastiti rad (CC BY-SA 3.0) putem Commons Wikimedia
2. "OSC Microbio 00 EE MPNTable" CNX OpenStax - (CC BY 4.0) preko Commons Wikimedia