Razlika između vektora kloniranja i vektora ekspresije
Share
ključna razlika između vektora kloniranja i vektora ekspresije je to vektor kloniranja nosi strani fragment DNK u stanicu domaćina, dok ekspresijski vektor olakšava ekspresiju gena u proteinima.
Vektor je važan pojam u molekularnoj biologiji. U rekombinantnoj DNK tehnologiji, glavna uloga vektora je osigurati način transporta do korisne frakcije DNA koja će biti umetnuta u stanicu domaćina. Štoviše, to je molekula DNA koja se koristi da bi umjetno prenosila fragment stranog DNA u stanicu domaćina koja treba biti eksprimirana ili replicirana. Najčešće korišteni vektori su plazmidi, virusni vektori, kosmidi i umjetni kromosomi. Vektor za kloniranje i ekspresijski vektor dvije su vrste vektora klasificiranih na temelju njihovih primjena.
SADRŽAJ
1. Pregled i ključne razlike
2. Što je klonirajući vektor
3. Što je ekspresijski vektor
4. Sličnosti između vektora kloniranja i vektora ekspresije
5. Usporedna usporedba - Vektor kloniranja i ekspresije u tabelarnom obliku
6. Sažetak
Što je vektor kloniranja?
Vektor za kloniranje je dio DNK koji se može upotrijebiti za umetanje stranih molekula DNA i ima sposobnost umetanja u domaćina u svrhu kloniranja. Idealna karakteristika vektora za kloniranje je jednostavno umetanje / uklanjanje fragmenta DNK restrikcijskim enzimom i liječenjem ligacijskim enzimom. U ovom aspektu, često korišteni vektori kloniranja su genetski inženjerirani plazmidi.
Slika 01: Vektor kloniranja
Vektor za kloniranje trebao bi imati više mjesta kloniranja, markerski gen koji se može odabrati i reporterski gen. Svrha mjesta kloniranja je osigurati mjesto za kloniranje. Markerni gen koji se može odabrati, pomaže u identificiranju uspješnih rekombinanta nakon kloniranja, a reporterski gen omogućuje probir i identifikaciju ispravnog rekombinanta među rekombinantima nakon kloniranja. Vektor kloniranja ne mora nužno pomoći da se eksprimira protein koji strani DNK kodira. Dakle, jedina svrha vektora kloniranja je prenošenje strane DNK u domaćina.
Što je ekspresijski vektor?
Ekspresijski vektor, koji se također naziva ekspresijski konstrukt, vrsta je vektora koji se koristi za ekspresiju proteina unutar stanice domaćina. Kao i svaki vektor, i ovaj bi trebao sadržavati glavne dijelove mjesto višestrukih kloniranja, markerski gen i reporterski gen. Vektor uvodi novi gen u domaćina i koristeći mehanizam sinteze proteina domaćina, omogućuje ekspresiju gena u domaćina. Nadalje, njegov početni fokus je stvaranje stabilne m-RNA i time stvaranja proteina. Dobar primjer je komercijalna proizvodnja inzulina. Gen inzulina uvodi se u bakterijski plazmid i ubacuje se natrag u tijelo bakterija E. coli, omogućujući razmnožavanju plazmida i omogućavanju rasta E. coli, lučeći inzulin koji se može sakupljati i koristiti.
Slika 02: Vektor ekspresije
Nadalje, ekspresijski vektor trebao bi imati snažnu promotorsku regiju, ispravan slijed inicijacije prevođenja i ispravan terminator kodon i niz. Ekspresijski vektori imaju brojne primjene u proizvodnji peptida i proteina za farmaceutsku industriju poput proizvodnje inzulina, hormona rasta, antibiotika, cjepiva, antitijela. Nadalje, vektori ekspresije pomažu u proizvodnji enzima u industriji hrane i odjeće. I ne samo to, ekspresijski vektori su presudni u proizvodnji transgenih biljaka poput zlatne riže, biljaka otpornih na insekte, biljaka otpornih na herbicide, itd..
Koje su sličnosti između kloniranog vektora i ekspresijskog vektora?
- Vektor kloniranja i ekspresija su dvije vrste vektora koje koristimo u rekombinantnoj DNK tehnologiji i genetskom inženjerstvu.
- Oba sadrže markerski gen i reporterski gen.
- Štoviše, sastoje se od više mjesta za kloniranje.
- Također, imaju podrijetlo replikacije i sposobnost samostalnog kopiranja.
Koja je razlika između kloniranog vektora i ekspresijskog vektora?
Vektor kloniranja je mala molekula DNA koja nosi strani fragment DNA u stanicu domaćina, dok je ekspresijski vektor vrsta vektora koji olakšava uvođenje, ekspresiju gena i proizvodnju proteina. Dakle, ovo je ključna razlika između kloniranog i ekspresijskog vektora. Nadalje, još jedna značajna razlika između klonirajućeg i ekspresijskog vektora je ta što vektor kloniranja unosi strani fragment DNA u domaćina, dok ekspresijski vektori izražavaju uvedeni gen stvarajući relevantni protein.
Nadalje, vektor kloniranja sastoji se od podrijetla replikacije, mjesta restrikcije i markera koji se može odabrati. Dok, ekspresijski vektor sadrži pojačivače, promotorsku regiju, završetak kodon, sekvencu inicijacije transkripcije, podrijetlo replikacije, mjesta restrikcije i marker koji se može odabrati. Dakle, ovo je i razlika između kloniranog i ekspresijskog vektora. Osim toga, plazmidi, bakteriofagi, bakterijski umjetni kromosomi, kozmidi, umjetni kromosomi sisavaca, umjetni kromosom kvasca itd., Primjeri su vektora za kloniranje. U međuvremenu, vektori ekspresije su uglavnom plazmidi.
Sažetak - Vektor kloniranja vs ekspresijski vektor
Na temelju njihove funkcije u molekularnoj biologiji postoje dvije vrste vektora kao vektor kloniranja i ekspresijski vektor. Vektor kloniranja je mala molekula DNA koja dovodi strane DNK u stanicu domaćina. Postoje različite vrste vektora kloniranja poput plazmida, bakteriofaga, bakterijskih umjetnih kromosoma, kosmida i umjetnih kromosoma sisavaca. Suprotno tome, ekspresijski vektor je plazmid koji unosi gen od interesa u stanicu domaćina i olakšava ekspresiju gena da bi se dobio proteinski produkt. Ekspresijski vektori su plazmidi. Dakle, ovo je sažetak razlike između vektora kloniranja i vektora ekspresije.
Referenca:
1. "Vektor ekspresije." Wikipedia, Zaklada Wikimedia, 30. travnja 2019., dostupno ovdje.
2. Lodish, Harvey. "Kloniranje DNK vektorima plazmida." Molekularna stanična biologija. 4. izdanje., Američka nacionalna medicinska knjižnica, 1. siječnja 1970., dostupno ovdje.
Ljubaznošću slike:
1. "BAC-i za kloniranje vektora Chem114A" Autor Zoragon7 - Vlastiti rad (CC BY-SA 4.0) preko Commons Wikimedia
2. „Ploča s replikom Amp“ Tinastella - (CC BY-SA 3.0) preko Commons Wikimedia
