Razlika između konkurentne i nekonkurentne ELISA

ključna razlika između konkurentne i nekonkurentne ELISA je to konkurentni ELISA koristi inhibicijski antigen dok nekompetitivni ELISA ne koristi inhibicijski antigen za ispitivanje.

Enzimski imunosorbentni test (ELISA) imunološki je test koji otkriva različite mete poput antitijela, antigena, proteina i glikoproteina. To je brz i jednostavan način za izvođenje. Stoga se češće koristi u istraživačke i dijagnostičke svrhe. ELISA uključuje upotrebu enzima i specifično vezanje antitijela i antigena. Na temelju načina reakcije postoje četiri vrste ELISA: direktna ELISA, neizravna ELISA, sendvič ELISA i inhibicijska ELISA. Izravni, neizravni i sendvič ELISA vrste su nekompetitivne ELISA, dok je inhibicija ELISA vrsta komplementarne ELISA. Glavni cilj ovog članka je raspravljati o razlici između konkurentne i nekonkurentne ELISA.

SADRŽAJ

1. Pregled i ključne razlike
2. Što je konkurentna ELISA
3. Što je nekonkurentna ELISA
4. Sličnosti između konkurentne i nekonkurentne ELISA
5. Usporedna usporedba - konkurentna vs nekonkurentna ELISA u tabelarnom obliku
6. Sažetak

Što je konkurentna ELISA?

Konkurentna ELISA mjeri koncentraciju antigena u uzorku otkrivanjem smetnji signala. Ovdje se u analizi koristi inhibitor antigen. Dakle, riječ je o vrsti inhibicije ELISA. Tijekom ovog postupka, antigeni prisutni u uzorku natječu se s odabranim referentnim antigenom za vezanje na specifičnu količinu obilježenog protutijela. Nadalje, ovaj postupak započinje inkubacijom uzorka, s prekomjernom količinom obilježenih antitijela. Također, referentni antigen treba biti prethodno premazan na ploči za ispitivanje s više jažica. Zatim se smjesa uzorka mora dodati u pokusnu ploču koja sadrži referentni antigen. Slobodna antitijela će se vezati na referentni antigen ovisno o količini antigena u uzorku. Dakle, ako je prisutno više uzorka antigena, otkrit će se manje referentnog antigena. Tako se stvara slabiji signal.

Slika 01: ELISA

Suprotno tome, kada uzorak sadrži manju količinu antigena, sve više i više referentnog antigena zauzet će antitijela i dati snažan signal. Budući da konkurentni ELISA daje jači signal kada uzorak sadrži malu količinu antigena, konkurentski ELISA je vrlo osjetljiv test, čak i za uzorke s malim brojem antigena.

U nekim konkurentnim ELISA setovima koristi se obilježeni antigen umjesto obilježenog antitijela. Ovdje će se obilježeni antigen i antigen uzoraka natjecati za vezanje na primarno antitijelo. Slično tome, kada je količina antigena u uzorku mala, količina obilježenog antigena koji se veže na antitijela bit će veća i stvorit će jači signal.

Što je nekonkurentna ELISA?

Među četiri vrste ELISA, tri vrste su nekonkurentski ELISA. To su direktna ELISA, neizravna ELISA i sendvič ELISA. Sva tri formata rade po zajedničkom principu ELISA-e, s malim razlikama u njihovim metodologijama.

Izravnim ELISA korištenjem enzima označenog primarnim antitijelom. Dakle, ne zahtijeva sekundarno antitijelo. Stoga je izravna ELISA brža od ostalih vrsta ELISA. Primarno antitijelo će se direktno vezati za imobilizirani ciljni antigen koji se nalazi u pločici. Stoga će se odvijati reakcija enzim-supstrat, proizvodeći vidljivi signal.

Slika 02: Sendvič ELISA

Za razliku od izravne ELISA, neizravna ELISA koristi neobilježeno primarno antitijelo i enzim označeno sekundarno antitijelo. Kad se primarno antitijelo veže na imobilizirani antigen, sekundarno antitijelo veže se za primarno antitijelo. Enzim u sekundarnom antitijelu reagirat će s antigenom i proizvesti vidljivi signal. Sendvič ELISA razlikuje se od izravne i neizravne ELISA. Ovdje je antitijelo imobilizirano na zid ispitne ploče.

Koje su sličnosti između konkurentne i nekonkurentne ELISA?

• Konkurentna i nekonkurentna ELISA dvije su vrste ispitivanja imunosorbensa.
• Vrlo su fleksibilne i osjetljive tehnike.
• Nadalje, i natjecateljski i nekonkurentni ELISA imunološki test je enzimski povezan.
• Također, obje metode generiraju signal zbog reakcije enzim-supstrat.

Koja je razlika između konkurentne i nekonkurentne ELISA?

Konkurentna ELISA je vrsta ELISA-e koja se oslanja na kompletiranje između antigena analita i obilježenog antigena za ograničenu količinu specifičnog antitijela. S druge strane, ne postoji takva konkurencija između antigena interesa i referentnog antigena u nekompetitivnoj ELISA. Dakle, to je ključna razlika između konkurentne i nekonkurentne ELISA. Slično tome, konkurentni ELISA je inhibicijski ELISA, dok nekonkurentni ELISA nije inhibicijski ELISA. Dakle, ovo je i razlika između konkurentne i nekonkurentne ELISA.

Štoviše, konkurentna ELISA je pogodnija za mjerenje male količine antigena od interesa. To je osjetljiva metoda. S druge strane, nekonkurentna ELISA ne ovisi o broju antigena prisutnih u uzorku. Dakle, ovo je i razlika između konkurentne i nekonkurentne ELISA.

Ispod infografike je objašnjena razlika između konkurentne i nekonkurentne ELISA.

Pregled - Konkurentni i nekonkurentni ELISA

Konkurentna i nekonkurentna ELISA dvije su glavne vrste ispitivanja ELISA ili imunosorbentom povezanih enzima. Rezimirajući razliku između konkurentnog i nekompetitivnog ELISA, kompetitivni ELISA se oslanja na konkurenciju između antigena od interesa i referentnog antigena prema ograničenoj količini antitijela. Stoga se konkurentni ELISA također naziva i inhibicijskim ELISA. S druge strane, nekompetitivni ELISA ne oslanja se na konkurenciju između ciljanih antigena i referentnih antigena. Koristi višak obilježenog specifičnog antitijela prema analitu koji ga zanima. Dakle, to je ključna razlika između konkurentne i nekonkurentne ELISA. Direktna ELISA, neizravna ELISA i sendvič ELISA tri su glavne vrste nekonkurentnog ELISA.

Referenca:

1. Bio-Rad. „Vrste ELISA | Bio-Rad „. Bio, dostupno ovdje.
2. "Četiri vrste ELISA-e." Cusabio Science Science - vaš biološki znanstveni partner, dostupan ovdje.

Ljubaznošću slike:

"Elisa tipus" Carolfv333 - Vlastito djelo (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
„Sendvič imunološki test, ELISA“ autor: NickCT - Vlastito djelo (CC BY-SA 3.0) preko Commons Wikimedia