Razlika između HPLC i HPTLC

Ključna razlika - HPLC u odnosu na HPTLC
 

Ključna razlika između HPLC i HPTLC je u tome HPLC omogućava kvantitativno razdvajanje komponenti u uzorku dok HPTLC ne dopušta kvantitativno razdvajanje komponenata u uzorku.

Kromatografija je fizička metoda odvajanja koja se koristi za odvajanje i identificiranje komponenata u smjesi. I HPLC i HPTLC su kromatografske tehnike. HPLC je tekućinska kromatografija visoke performanse. HPTLC je visoko učinkovita tankoslojna kromatografija.

SADRŽAJ

1. Pregled i ključne razlike
2. Što je HPLC
3. Što je HPTLC
4. Usporedna usporedba - HPLC vs HPTLC u tabelarnom obliku
5. Sažetak

Što je HPLC?

HPLC je tekuća kromatografija visokog učinka. To je analitička tehnika koja se koristi za odvajanje, identificiranje i kvantificiranje komponenata u smjesi. Kod ove tehnike uzorak se otopi u pogodnom otapalu. Zatim se otapalo sa uzorkom propušta kroz pumpu s danim tlakom. Crpka je napunjena čvrstim adsorbentnim materijalom. Tada se neke komponente snažno vežu na apsorpcijski materijal, dok se druge komponente vezuju slabo. Zbog toga komponente imaju različite brzine protoka kroz crpku. Stoga se komponente mogu lako razdvojiti.

Slika 01: HPLC sustav

Adsorpcijski materijal koji puni crpku poznat je pod nazivom stacionarna faza. Otapalo s otopljenim uzorkom poznato je kao pokretna faza. Crpka koja se koristi u ovoj tehnici naziva se stupac. Stupac je napunjen adsorbenškim materijalom, najčešće česticama silike. Veličina ovih čestica može biti u rasponu od 2-50 µm. Na postupak odvajanja utječe sastav pokretne faze i temperatura sustava. Interakcije između stacionarne faze i komponente u uzorku mogu biti hidrofobne interakcije, dipol-dipolne interakcije, ionsko vezivanje itd..

Radni tlak HPLC znatno je viši od tlaka tradicionalne tekućinske kromatografije. Leži oko 50-350 bara. Razlika između tekuće kromatografije i HPLC je da u tekućoj kromatografiji uzorak prolazi kroz stup pod gravitacijom dok je u HPLC uzorak pod pritiskom kroz kolonu. Veličina kolone i upijajućih čestica također su vrlo malene u usporedbi s tradicionalnom tekućinskom kromatografijom. Međutim, razlučivost koju daje HPLC tehnika je bolja.

Što je HPTLC?

HPTLC je tankoslojna kromatografija visoke performanse. To je napredni i automatizirani oblik tradicionalnog TLC-a. Ova tehnika omogućava učinkovito rješavanje u kratkom vremenskom razdoblju. U ovoj metodi analize uzorak i referentna vrijednost mogu se istovremeno analizirati, što omogućava usporedbu uzorka s referencom. Daje poboljšanu analitičku točnost od ostalih kromatografskih tehnika. Vrijeme potrebno za analizu je manje. Tehnika je jeftina tehnika.

Slika 02: Analiza prehrambenih boja pomoću HPTLC-a

HPTLC metoda je jednostavan postupak, a korak pripreme uzorka je također eliminiran (U tradicionalnom TLC-u, korak pripreme uzorka uključen je prije odvajanja. Taj korak uključuje čišćenje i obogaćivanje). Otapalo se može koristiti izravno bez ikakvog predobrade, iako druge kromatografske tehnike zahtijevaju predobradu, poput otplinjavanja, filtracije, itd..

Materijal adsorbensa koji se koristi u HPTLC je silika, s vrlo malim veličinama čestica. U tradicionalnoj TLC veličina čestica silikagela je 5-20 μm dok je u HPTLC-u 4-8 μm. Uzorak se aplicira na HPTLC ploču. Daje jednoliku i sigurnu primjenu. Tada se ploče postavljaju u komoru koja ima pokretnu fazu. Komora treba biti zasićena parom pokretne faze. Nakon procesa HPTLC, mrlje koje se pomjeraju mogu se prepoznati. Za otkrivanje mrlja na ploči, HPTLC tehnika koristi pogodno UV područje ili jodnu komoru.

Koja je razlika između HPLC i HPTLC?

HPLC vs HPTLC
HPLC je tekućinska kromatografija visoke performanse.	HPTLC je visoko učinkovita tankoslojna kromatografija.
Tehnika
U HPLC-u se pokretna faza s otapalom propušta kroz kolonu napunjenu stacionarnom fazom.	U HPTLC, uzorak se nanosi na TLC ploču i stavlja se u komoru koja sadrži pokretnu fazu; tada se uzorku dopušta migriranje prema ploči uz pokretnu fazu.
Mjerenje
U HPLC-u se razlike između brzina protoka komponenata kroz stupac koriste za razdvajanje komponenata u uzorku.	U HPTLC-u, razlike između pređenih udaljenosti svake komponente u uzorku koriste se za razdvajanje komponenti u uzorku.
Kvantitativno razdvajanje
HPLC omogućava kvantitativno razdvajanje komponenata u uzorku.	HPTLC ne dopušta kvantitativno razdvajanje komponenata u uzorku.

Sažetak - HPLC vs HPTLC

HPLC i HPTLC su dvije kromatografske tehnike. Ključna razlika između HPLC i HPTLC je da HPLC omogućava kvantitativno razdvajanje komponenata u uzorku dok HPTLC ne dopušta kvantitativno razdvajanje komponenata u uzorku..

Referenca:

1. „Tekuća kromatografija visokog učinka.“ Wikipedia, Zaklada Wikimedia, 10. travnja 2018., dostupno ovdje.
2. "HPTLC." LinkedIn SlideShare, 30. svibnja 2011., dostupno ovdje.

Ljubaznošću slike:

1. "HPTLCplatetoMS" napisao Kjaergaard s engleske Wikipedije - Prebačen iz en.wikipedia u Commons (Public Domain) putem Commons Wikimedia
2. "Hplc" PD Dr. rer. nat. Habil. Gertrud Morlock, izvanredni profesor (Privatdozentin), Sveučilište u Hohenheimu, Institut za kemiju hrane - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Bibliography Service 103 (2009) via Commons Wikimedia