Pogledajmo prvo značenje HPLC-a i LCMS-a prije nego što analiziramo razliku između HPLC i LCMS-a. Kromatografija je tehnika razdvajanja u kemijskoj analizi gdje su sastojci uzorka odvojeni tijekom prolaska kroz kromatografski medij. Također uključuje interakciju s uzorkom, stacionarnom i pokretnom fazom. HPLC znači Tekuća kromatografija visokog učinka, a koristi se kao metoda tekuće kromatografije u analitičkoj kemiji. Kombinacija Tekuća kromatografija i masna spektroskopija (LCMS) razvijena je za kvantitativnu analizu odabranih biomolekula i to je vrlo osjetljiv, točan i specifičan postupak ispitivanja u usporedbi s HPLC-om. Ovo je ključna razlika između HPLC i LCMC. Ovaj će vam članak predstaviti HPLC i LCMC koji se bave kemijskom analizom i raspravljati o razlikama između HPLC i LCMS.
Tekuća kromatografija visoke učinkovitosti (HPLC) je popularna tehnika razdvajanja u analitičkoj kemiji. Uglavnom je koristi se za odvajanje komponenata, za identificiranje i kvantificiranje svake komponente u smjesi. Ranije je ova metoda bila poznata kao visokotlačna tekuća kromatografija jer je ovisilo o crpkama za protok tekućeg otapala pod pritiskom koji sadrži smjesu uzorka kroz stupac nabijen čvrstim adsorbenskim materijalom. Svaki sastojak u uzorku smjese različito djeluje s čvrstim adsorbenskim materijalom, što rezultira različitim protokom različitih sastojaka. To može dovesti do odvajanja sastavnih dijelova dok istječu u HPLC kolonu.
HPLC se koristi za razne aplikacije kao što su analiza razine vitamina D u krvi, ilegalna upotreba droga sportaša otkrivanjem ostataka lijeka u njihovoj mokraći, sortiranje sastavnih dijelova složenog biološkog uzorka u istraživačke svrhe i analize i proizvodnja lijekova.
Tekuća kromatografija-masena spektrometrija (LCMS) analitička je tehnika koja kombinira sposobnost fizičke separacije tekuće kromatografije sa sposobnostima analize mase masene spektrometrije (MS). Tekuća kromatografija je tehnika razdvajanja, a masena spektrometrija koristi se za analizu odnosa mase i napunjenosti čestica. Fizičko odvajanje obično se postiže HPLC-om, a alternativno je poznat i LCMS HPLC-MS. LCMS je a dominantna analitička tehnika koja ima a vrlo visoka točnost, osjetljivost i specifičnost u usporedbi s HPLC-om. Stoga je koristan u mnogim primjenama kao što su istraživačke svrhe, analiza lijekova, analiza hrane itd. Uglavnom su LCMS koristi se za odvajanje, otkrivanje, identificiranje i kvantificiranje biokemijskih svojstava određenog uzorka u prisutnosti složenih kemijskih smjesa.
HPLC: HPLC je kratica za tekućinsku kromatografiju visoke učinkovitosti. To je tehnika razdvajanja koja se uglavnom koristi za odvajanje komponenti, za identificiranje i kvantificiranje svake komponente u smjesi.
LCMS: LCMS značiTekuća kromatografija i masna spektrometrija. To je analitička tehnika koja kombinira fizičke sposobnosti razdvajanja tekućinske kromatografije sa sposobnostima analize mase masene spektrometrije (MS).
HPLC: Ovo je samo metoda tekuće kromatografije.
LCMS: Ovo je kombinacija metode tekuće kromatografije i metode masene spektrometrije.
HPLC: U usporedbi s LCMS-om, HPLC analiza je manje učinkovita i sporija.
LCMS: U usporedbi s HPLC-om, LCMS analiza je učinkovita i brža.
HPLC: U usporedbi s LCMS-om, HPLC analiza je manje osjetljiva.
LCMS: U usporedbi s HPLC-om, LCMS analiza je osjetljivija.
HPLC: U usporedbi s LCMS-om, HPLC analiza je manje specifična.
LCMS: U usporedbi s HPLC-om, LCMS analiza je specifičnija.
HPLC: HPLC daje manje točne rezultate od LCMS-a za određivanje nekih kemikalija.
LCMS: LCMS daje preciznije rezultate nego HPLC za određivanje nekih kemikalija.
HPLC: HPLC se može smatrati komponentom LCMS-a.
LCMS: LCMS se ne može smatrati komponentom HPLC-a.
HPLC: Izvor jona ne postoji u HPLC instrumentu.
LCMS: Izvor jona prisutan je u LCMS instrumentu.
HPLC: Ioni, polimeri, organske molekule i biomolekule mogu se analizirati pomoću HPLC.
LCMS: Organske molekule i biomolekule mogu se analizirati. Za razliku od HPLC, LCMS se može koristiti za ispitivanje nepotpuno razrijeđenih smjesa.
HPLC: Dijagram HPLC instrumenta dat je na slici 1, a obično uključuje autosampler, pumpe i detektor. Uzorak za uzorkovanje uvodi uzorku smjese u pokretnu fazu (mješavina otapala pod tlakom kao što su voda, acetonitril i / ili metanol) koja ga prenosi u kolonu. Crpke isporučuju željeni protok i sastav pokretne faze kroz kolonu. Stupac je napunjen adsorbentom, koji je zrnasta čvrsta čestica poput silika ili polimera. Detektor proizvodi signal proporcionalan količini prisutnosti sastojaka uzorka u koloni, omogućavajući tako kvantitativnu analizu odabranih sastojaka uzorka. HPLC instrument kontrolira se, a analiza podataka pruža digitalni mikroprocesor i korisnički softver.
Slika 1: Dijagram HPLC instrumenta
LCMS: Dijagram LCMS instrumenta dan je na slici 2. Ekstrakt uzorka umetnut je u stupac koji se sastoji od HPLC. U ovom stupcu se nalaze uzorci metabolita na temelju fizičkih znakova, a različiti se metaboliti u različitim vremenskim intervalima prelijevaju u maseni spektrometar. Masena spektroskopija koristi se za procjenu mase čestica, za određivanje elementarnog rasporeda molekule i za razjašnjenje struktura molekula. Međutim, uzorak treba ionizirati kako bi se stvorile nabijene molekule kako bi se odredio njihov omjer mase do naboja. Stoga se umjesto HPLC instrumenata, LCMS sastoje od dodatnih triju modula kao što su izvor željeza, analizator mase i detektor. Izvor iona može transformirati uzorak plinske faze u ione, a analizator mase grupirajući ione po njihovoj masi pomoću elektromagnetskog polja. Konačno, detektor kvantificira vrijednosti i donosi podatke o svakom ionu koji je prisutan u uzorku. LCMS tehnika može se koristiti za kvalitativne i kvantitativne primjene.
Slika 2: Dijagram LCMS instrumenta
Zaključno, HPLC je metoda tekuće kromatografije, dok je LCMS kombinacija tekuće kromatografije i masene spektrometrije. Obje ove tehnike analize imaju različite karakteristike, ali se mogu koristiti za identificiranje i kvantificiranje sastava hrane, lijekova i drugih bioaktivnih molekula.
Literatura Arpino, P. (1992). Kombinirana tekuća kromatografija masene spektrometrije. III dio. Primjene termospreja. Pregledi masne spektrometrije, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. i Spoendlin, C. (2004). Praktični aspekti brze tekućinske kromatografije reverzne faze pomoću 3 μm stupova i monolitnih stupova u farmaceutskom razvoju i proizvodnji koji rade u skladu s trenutnom dobrom proizvodnom praksom. Časopis za kromatografiju, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. i Kerns, E. H. (1999). Primjene LC / MS u razvoju lijekova. Pregledi masne spektrometrije, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Spajanje laserske desorpcije / ionizacije s matriksom na razdvajanje tekućina. Pregledi masne spektrometrije 16 (5): 283. Ljubaznošću slike: "Hplc" izvornog učitao je Kjaergaard na en.wikipedia - prenio sa en.wikipedia. (Javna domena) putem Commonsa