ključna razlika Između HPLC i UPLC je da HPLC omogućava analizu čestica čija veličina iznosi oko 5 mikrometra dok UPLC omogućava mnogo manje čestica oko 2 mikrometra.
HPLC i UPLC su oba tekuća kromatografska tehnika koja su korisna u odvajanju sastojaka spoja. Da bismo znali razliku između HPLC i UPLC, prvo moramo znati što je HPLC. To je zato što je UPLC posebna verzija HPLC-a i lako ga možemo razumjeti ako znamo što je HPLC.
1. Pregled i ključne razlike
2. Što je HPLC
3. Što je UPLC
4. Usporedna usporedba - HPLC vs UPLC u tabličnom obliku
5. Sažetak
Izraz HPLC označava visoke performanse Tekuća kromatografija. To je tehnika kojom se možemo koristiti za odvajanje različitih sastojaka spoja. Također se najčešće koristi tehnika prepoznavanja, kvantificiranja i odvajanja komponenata smjese. Uz to, ova se tehnika koristi visokim tlakom da bi se otapalo proguralo kroz kolonu. Nadalje, glavne primjene HPLC-a su u biokemiji za analizu sastojaka spoja. Idealan je način za odvajanje i identifikaciju aminokiselina, nukleinskih kiselina, proteina, ugljikovodika, pesticida, ugljikohidrata, antibiotika, steroida i bezbroj drugih anorganskih tvari.
Slika 01: HPLC sustav u laboratoriju
Ukratko, metoda rada HPLC tehnike je sljedeća. Prvo bismo trebali uvesti uzorak u tok mobilne faze u diskretnim malim količinama pomoću pumpe. Tlak pumpe treba održavati na 40 MPa. Zatim se ovaj tok mobilne faze probija kroz kolonu HPLC. Također, komponente u uzorku prolaze kroz stupac. Međutim, njihove se brzine kretanja razlikuju jedna od druge. Ova razlika nastaje zbog razlike u interakcijama između komponenata uzorka i adsorbensa unutar stupca. Ovaj adsorbent nazivamo stacionarnom fazom, jer se nalazi unutar stupca (ne pomiče se). Drugo, na kraju stupca možemo prikupiti uzorak koji eluira iz kolone. Tamo možemo utvrditi razlike u vremenima zadržavanja za svaku komponentu u uzorku.
Izraz UPLC znači Tekuća kromatografija ultra visoke učinkovitosti. To je varijacija HPLC-a, ali metoda rada je ista. Međutim, za razliku od HPLC-a, ova metoda omogućuje analizu vrlo sitnih čestica, poput sitnih čestica 2 mikrometra.
Slika 02: UPLC uređaj
Štoviše, omogućava bržu analizu. U ovoj tehnici koristimo tlak pumpe od 100 MPa za ubacivanje uzorka u stupac. Stoga, ovaj visoki tlak potvrđuje da se cijeli uzorak unosi u kolonu. Dakle, ovo je vrlo učinkovito u usporedbi s HPLC-om.
Izraz HPLC označava tekućinsku kromatografiju visokih performansi, dok termin UPLC predstavlja tekućinsku kromatografiju ultra visoke učinkovitosti. Stoga je UPLC tehnika razvijena verzija HPLC-a. Dakle, metoda rada je jednaka za obje tehnike. Međutim, UPLC je učinkovitiji u usporedbi s HPLC-om jer koristi visoki tlak pumpe; tlak pumpe za HPLC je 40 MPA dok je 100 MPa za UPLC. Dakle, ovo je razlika između HPLC i UPLC. Prije svega, ključna razlika između HPLC i UPLC je ta što HPLC omogućava analizu čestica čija veličina iznosi oko 5 mikrometara dok UPLC omogućava mnogo manje čestica oko 2 mikrometra.
UPLC je oblik HPLC. Dakle, metode rada su iste. No, u UPLC-u možemo pronaći neke poboljšane značajke u usporedbi s HPLC-om. Stoga postoji razlika između HPLC i UPLC. Međutim, ključna razlika između HPLC i UPLC je da HPLC omogućava analizu čestica čija veličina iznosi oko 5 mikrometara dok UPLC omogućava mnogo manje čestica oko 2 mikrometra.
1. „Tekuća kromatografija visokog učinka.“ Wikipedia, Zaklada Wikimedia, 20. listopada 2018. Dostupno ovdje
2. "UPLC." Wikipedia, Zaklada Wikimedia, 25. listopada 2017. Dostupno ovdje
1. "Hplc" napisao Kjaergaard na engleskoj Wikipediji (Javna domena) putem Commons Wikimedia
2. ”Slika UPLC uređaja” Autor Groep29 BFW - Vlastiti rad, (Public Domain) preko Commons Wikimedia