Ribonukleaze su nukleaze koje specifično razgrađuju RNA na manje jedinice. Mogu se podijeliti u dvije kategorije; endoribonukleaze i eksoribonukleaze. Endoribonukleaza je endonukleaza koja može razgraditi jednolančanu ili dvolančanu RNA. On cijepa fosfodiesterske veze u polinukleotidnom lancu RNA. Primjeri su RNaza A, RNaza III, RNaza T1, RNaza P i RNaza H. Exoribonuclease je egzonuklaza koja je degradirala RNA uklanjanjem terminalnih nukleotida iz 5'-kraja ili 3'-kraja RNA molekule. Primjeri su RNaza R, RNaza II, RNaza D i RNaza PH. ključna razlika između RNASE A i RNASE H je da je RNase A je ribonukleaza gušterače koja specifično razgrađuje jednolančanu RNK na manje komponente dok je RNase H nespecifičan enzim koji cijepa RNK u hibridu RNA-DNA na manje jedinice pomoću hidroliznog mehanizma.
1. Pregled i ključne razlike
2. Što je RNASE A
3. Što je RNASE H
4. Sličnosti između RNASE A i RNASE H
5. Usporedna usporedba - RNASE A protiv RNASE H u tabelarnom obliku
6. Sažetak
RNaza A je ribonukleaza gušterače koja posebno cijepa neparne ostatke citozina i uracila na 3 'kraju jednolančane RNA. RNase H djeluje na višoj koncentraciji soli (0,3 M ili veće koncentracije NaCl). Hidrolitička reakcija je dva koraka. Tvori 3 'fosforilirani produkt preko 2', 3 'cikličkog monofosfatnog intermedijara. Iako je specifična za jednolančane RNA s višom koncentracijom soli, ona također može razgraditi dvolančanu RNK i RNA u hibridu RNA-DNA kod niže koncentracije NaCl (niže od 0,3M NaCl).
Bruce Merrifield prvi je sintetizirao ovaj enzim. RNaza A je vrlo popularan enzim u molekularnim istraživanjima. RNaza A goveda pankresa je primjer RNaze A. I to je jedan od najtvrđih enzima koji se koriste u laboratoriju. Ovom enzimu nije potreban kofaktor za svoju aktivnost. To je visoko termostabilni enzim. RNaza A je prvi enzim i treći protein kojem je otkriven ispravan niz aminokiselina. Ovaj enzim je vrlo mali sa 124 aminokiseline i molekularnom masom od 12600da. A ima četiri Histidinska ostatka (njegovih 12 i njegovih 119 koji uključuju katalitičku reakciju).
Slika 01: RNaza A
RNaza A može se izolirati kuvanjem sirovog uzorka. Kad proključa, svi ostali enzimi razgrađuju preostalu RNazu A. RNaza A je nevjerojatno stabilan enzim. Ovaj enzim inhibira proteinske inhibitore ribonukleaze, teške metale i uridin vanadate.
RNaza H je nespecifični enzim ribonukleaze koji može razgraditi RNA u hibridu RNA-DNA putem hidrolizne reakcije. RNase H cijepa 3'-O-P vezu RNA u hibridu RNA-DNA. Konačno proizvodi 3'OH i 5 'fosfatne proizvode. U replikaciji DNK igra ključnu ulogu uklanjanjem RNA prajmera nakon što se formiraju novi lanci DNK. U laboratorijskim uvjetima, ona specifično razgrađuje RNA u hibridu RNA-DNA, ali ne u DNA i nehibridiziranu RNA. I ovaj se enzim obično koristi za uništavanje RNA predloška nakon što se formira prvi komplementarni lanac DNA tijekom sinteze cDNA.
Slika 02: RNase H
RNase H se također koristi u testovima zaštite od nukleusa. Može se ugraditi i u uklanjanje poli A repa iz mRNA. RNase H ima sposobnost uništavanja nekodirajuće RNA unutar i izvan stanice. Metalni ioni potrebni su kao kofaktori za ovu aktivnost proteina. Kelator (EDTA) se može upotrijebiti za inhibiciju enzima RNase H.
RNASE A vs RNASE H | |
RNase A je ribonukleaza gušterače koja posebno cijepa 3 'kraj neparnih citozina i ostataka uracila jednolančane RNA u višoj koncentraciji soli. | RNase H je nespecifični enzim ribonukleaze koji može razgraditi RNA u hibridu RNA-DNK hidroliznom reakcijom. |
Priroda cijepanja RNA | |
RNase A posebno cijepa jednolančanu RNA s višom koncentracijom soli. | RNase H cijepa RNA u hibridu RNA-DNA. |
Potreba čimbenika aktivnosti | |
RNase A ne trebaju kofaktori za svoju aktivnost. | RNase H su potrebni ioni metala kao kofaktori za svoju aktivnost. |
Inhibitori aktivnosti proteina | |
Protein inhibitora ribonukleaze, teški metali i uridin vanadata inhibira aktivnost RNAse A. | Kelator (EDTA) inhibira aktivnost RNase H. |
Uklanjanje temeljnog uzorka RNA u replikaciji DNA | |
RNase A se ne koristi za uklanjanje prajmera RNA u replikaciji DNA. | RNase H koristi se za uklanjanje prajmera RNA u replikaciji DNA |
Uklanjanje DNK predloška u komplementarnoj sintezi DNA (C-DNA) | |
RNaza A se ne koristi za uklanjanje RNA predloška tijekom komplementarne sinteze DNK (C-DNA). | RNase H koristi se za uklanjanje RNA predloška tijekom komplementarne sinteze DNA (C-DNA). |
Uklanjanje poli-A-repa iz mRNA hibridizirane na Oligo (dt) | |
RNase A se ne koristi za uklanjanje "poly-A repa" u mRNA hibridiziranom na oligo (dt). | RNase H koristi se za uklanjanje "poly-A repa" u mRNA hibridiziranom na oligo (dt) |
Ribonukleze su enzimi nukleusa koji imaju sposobnost cijepanja RNK na manje jedinice. Dvije su vrste; endoribonukleaze i eksoribonukleaze. Endoribonukleaza je endonukleaza koja ima sposobnost razgradnje jednolančane ili dvolančane RNA. I on cijepa fosfodiestersku vezu unutar RNA polinukleotidnog lanca. RNaza A i RNaza H su dvije endoribonukleaze. RNaza A je ribonukleaza gušterače koja posebno cijepa neparne ostatke citozina i uracila na 3 'kraju jednolančane RNA u višoj koncentraciji soli. RNase H je nespecifični enzim ribonukleaze koji može razgraditi RNA u hibridu RNA-DNA putem hidrolizne reakcije. Ovo je razlika između RNaze A i RNaze H.
Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti je za izvanmrežne svrhe, prema napomeni. Ovdje preuzmite PDF verziju. Razlika između RNASE A i RNASE H
1.Karuturi, Autor Amrutha. "17 treba znati činjenice o RNase A." AG Blog, 22. veljače 2017. Dostupno ovdje
2. „ribonukleaza.” Wikipedia, Zaklada Wikimedia, 5. siječnja 2018. Dostupno ovdje
1.'RNase A'By Nije dostupan autor za čitanje autora. Vossman pretpostavlja (na temelju tvrdnji o autorskim pravima)., (CC BY-SA 2.5) putem Commons Wikimedia
2.'RNase H fix'By Nije dostavljen strojno čitljiv autor. Vossman pretpostavlja (na temelju tvrdnji o autorskim pravima)., (CC BY-SA 2.5) putem Commons Wikimedia